-
技術文章
細胞的復蘇--注意事項
細胞的復蘇(2)--注意事項注意事項:1.使用DMSO前,不需要進行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會破華它的分子結構,以至于降低冷凍保護效果。在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時戴上手套操作。2.不宜將凍存細胞放置在0℃~-60℃這一溫度范圍內過久,低溫損傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內,是“危險溫區(qū)”。3.注意定期檢查液氮罐內液氮量,及時添加。細胞培養(yǎng)三不要養(yǎng)細胞是醫(yī)學研究生的基本功。我養(yǎng)過骨髓MSC、心肌細胞、心肌成纖維細胞、AD293腺病毒包裝細胞、PA317...
+
-
技術文章
使用熒光底物的直接 ELISA 實驗方案
使用熒光底物的直接ELISA實驗方案使用熒光底物的直接ELISA實驗方案]實驗步驟第1天:1.在濾過的PBS中稀釋包被抗體后,在每孔中加入100μl進行包被。用封板膜覆蓋酶標板,將酶標板在4℃下孵育一夜。第2天:2.將4gBlockACE粉末稀釋于100ml去離子水中,使用其1:4稀釋液在每孔中加入200μl,在室溫下封閉酶標板3小時,封閉期間用封板膜覆蓋酶標板。3.洗滌酶標板:PBS-T(0.05%[熒光底物直接ELISA熒光抗體包被]實驗步驟第1天:1.在濾過...
+
-
技術文章
單克隆抗體制備過程與原理
單克隆抗體制備過程與原理單克隆抗體(MAb)是針專一的抗原決定簇產生的抗體,單克隆技術又名雜交瘤技術起源于1975年,由G.K?hler和Milstein創(chuàng)立。主要原理是利用產生抗體的B細胞與腫瘤細胞雜交融合成雜交瘤細胞,生產抗體。單克隆抗體制備過程有以下幾個步驟,下面講簡要介紹。1、免疫動物免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產生致敏B淋巴細胞的過程。一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠,按照預先制定的免疫方案進行免疫注射??乖ㄟ^血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進入外周免疫器官,刺激...
+
-
技術文章
懸浮培養(yǎng)細胞傳代步驟
懸浮培養(yǎng)細胞傳代步驟絕大多數(shù)有限細胞系、連續(xù)細胞系的原代培養(yǎng)都是貼壁依賴的,因此依附于某一表面形成單細胞層。但是還有一些細胞,特別是來源于血液系統(tǒng)或某些特定腫瘤組織的細胞,是不依賴于貼壁的,懸浮生長。懸浮細胞培養(yǎng)與單層細胞培養(yǎng)相比有很多優(yōu)點。其中zui大的優(yōu)勢是,傳代時只需要對細胞進行稀釋即可,由于不存在蛋白水解酶、機械力等造成的創(chuàng)傷,傳代后基本不會影響細胞生長速率。此外,懸浮培養(yǎng)的細胞能充分利用培養(yǎng)空間,而且能夠非常直觀觀察到細胞規(guī)模擴大。細胞可以在類似于培養(yǎng)酵母菌或細菌的...
+
-
技術文章
為什么睡前想喝水 ?
為什么睡前想喝水?麥吉爾大學的研究人員發(fā)現(xiàn),大腦的生物鐘會在睡前刺激神經,引起口渴。這項研究已發(fā)表于2016年9月29日的Nature。這項發(fā)現(xiàn)及其背后的分子機制,使人們初步了解了生物鐘是如何調節(jié)生理功能。雖然這項研究是在小鼠身上進行,但是本文的資深作者,來自麥吉爾大學神經學系和麥吉爾大學健康中心的腦修復與整合神經科學(integrativeneuroscience)項目的CharlesBourque教授指出,“這些發(fā)現(xiàn)能夠為受體靶向的藥物的研究指明方向,從而減輕那些飽受時差...
+
-
技術文章
干細胞移植領域重磅級研究進展一覽
干細胞移植領域重磅級研究進展一覽干細胞醫(yī)療技術的臨床應用開始于1968年,當年科學家們完成了世界上*例骨髓移植術,其有效成分是造血干細胞。此后,造血干細胞移植被大量用于治療某些惡性血液病和腫瘤,而造血干細胞的來源逐漸從骨髓替換為外周血,進而是臍帶血。1988年來自法國的研究者Gluckman教授在上成功采用臍血造血干細胞移植,救治了一名貧血患兒,這項研究標志著臍帶血造血干細胞移植時代的開啟。如今每年大約會進行6萬例骨髓移植手術,其中使用自體和同種異體造血干細胞完成骨髓移植術的...
+
-
技術文章
如果*消滅癌癥,人能多活幾年?
如果*消滅癌癥,人能多活幾年?如果科學家成功了,消滅了癌癥,人類壽命能增加多少?這是個非常有趣的問題。我相信大家都希望癌癥從世界消失,但只談延長壽命的話,攻克癌癥到底有多大好處?要仔細解答這個問題需要不少統(tǒng)計數(shù)據(jù),但我們可以偷懶,把這個問題簡化為:“不是因為癌癥而去的人,平均壽命(Z)是多少?”消滅癌癥,所有人的壽命就應該接近Z。這個數(shù)據(jù)直接也查不到,但我們可以粗糙算一下,需要三個數(shù)據(jù):全民平均壽命(T),因癌癥去人數(shù)比例(B),因癌癥去人數(shù)平均壽命(C)。公式應該是:C*B...
+
-
技術文章
腫瘤微環(huán)境如何介導癌細胞對常規(guī)化療產生耐受性?
腫瘤微環(huán)境如何介導癌細胞對常規(guī)化療產生耐受性?近日,刊登于雜志Oncotarget上的一項研究報告中,來自Bellvitge生物醫(yī)學研究所的研究人員通過研究揭示了腫瘤微環(huán)境在結直腸癌對療法產生耐受性過程中的關鍵作用,結直腸癌是第四大常見的癌癥,也是引發(fā)癌癥患者死亡的主要原因。文章中,研究者揭示了腫瘤微環(huán)境中特定分子如何保護腫瘤細胞免于常規(guī)化療方法的殺滅,對療法產生耐受性是如今很多癌癥患者面臨的巨大治療障礙,因此闡明癌細胞對療法產生耐受性的機制就顯得尤為重要了。癌相關的成纖維細...
+
-
技術文章
華人女科學家董欣年院士Cell發(fā)布重要免疫成果
華人女科學家董欣年院士Cell發(fā)布重要免疫成果來自杜克大學、香港中文大學、上海師范大學的研究人員證實,核孔透化是效應子觸發(fā)的免疫(Effector-TriggeredImmunity,ETI)中一個會聚信號傳導事件。這一重要的研究發(fā)現(xiàn)發(fā)布在8月25日的《細胞》(Cell)雜志上。領導這一研究的是杜克大學華人女科學家董欣年(XinnianDong)教授,其早年畢業(yè)于武漢大學,在哈佛大學完成博士后研究,2012年當選為美國國家科學院院士。董欣年院士主要研究方向為水楊酸和茉莉酸介導...
+
-
技術文章
胰腺癌:脂肪和較差預后相關
胰腺癌:脂肪和較差預后相關肥胖問題日益嚴重,對衛(wèi)生系統(tǒng)的影響遠大于原來的預期,因為研究者們發(fā)現(xiàn),肥胖是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的一大風險因素。肥胖個體胰腺導管腺癌——癌癥相關死亡的第四大原因——的發(fā)病率明顯上升。癌癥的一個標志是炎性微環(huán)境,但肥胖個體中周圍結締組織(基質)的改變如何影響癌癥的發(fā)生、發(fā)展并不明確。Incio等人發(fā)表在《癌癥發(fā)現(xiàn)》(CancerDiscovery)雜志上的論文研究了在小鼠和人體中,腫瘤周圍的脂肪細胞促進腫瘤的發(fā)生和發(fā)展的機制。胰腺腫瘤形成涉及到明顯的組織結構...
+
-
技術文章
癌細胞如何在沒有葡萄糖的條件下繼續(xù)增殖擴張?
癌細胞如何在沒有葡萄糖的條件下繼續(xù)增殖擴張?腫瘤細胞zui主要的目標就是生存,其甚至不惜破壞其所依附的有機體的健康也要達到生存的目的;為了生存腫瘤細胞會練就許多健康細胞沒有的本領,包括在葡萄糖水平極低的情況下繼續(xù)保持生長勢頭,而這或許就是常用的抗血管生成因子難以消除癌癥的主要原因,腫瘤細胞通常會通過妨礙提供常規(guī)的營養(yǎng)物質和葡萄糖的血管的發(fā)育來影響機體健康,如今來自西班牙國立癌癥研究中心(CNIO)的研究人員通過研究鑒別出了一種關鍵的生化機制,該機制可以使得癌細胞在沒有葡萄糖的...
+
-
技術文章
闡明癌細胞行為異常的分子機制
闡明癌細胞行為異常的分子機制刊登在雜志ScientificReports上的一項研究報告中,來自蘭卡斯特大學的研究人員通過研究在癌癥樣的異常細胞中觀察到了特殊的代謝開關,細胞能量代謝的改變或許是引發(fā)許多疾病的標志,而這往往會使細胞從健康狀態(tài)轉變成為異常的代謝狀態(tài)。癌細胞的代謝開關通常會通過有氧呼吸供能轉變?yōu)樘墙徒饣蛉紵咸烟莵砉┠埽芯空弑硎?,這些都是在酵母細胞中所觀察到的結果,當然我們會在實驗室中對這種現(xiàn)象進行深入研究。對生物性振蕩感興趣的物理學家已經對來自酵母細胞的數(shù)據(jù)進...
+