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產(chǎn)品中心細(xì)胞生物學(xué)美國(guó)ATCC細(xì)胞/ 美國(guó)sciencellMCF7 MCF-7（人乳腺癌細(xì)胞）
更新時(shí)間：2025-10-25
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪問(wèn)量：2645
服務(wù)熱線86-021-61998208
產(chǎn)品分類(lèi)
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MCF7 MCF-7（人乳腺癌細(xì)胞）
目錄號(hào) | KL-C1771H |
細(xì)胞英文(簡(jiǎn)稱(chēng)） | MCF7 [MCF-7] |
細(xì)胞名稱(chēng) | MCF7 [MCF-7]（人乳腺癌細(xì)胞） |
背景資料 | MCF-7細(xì)胞保留了多個(gè)分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通過(guò)胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成圓形復(fù)合物（domes）。該細(xì)胞含有Tx-4癌基因。腫瘤壞死因子α（TNF alpha）可以抑制MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)?？勾萍に靥幚砑?xì)胞能調(diào)變IGFBP’S的分泌。 |
代次 | P3 |
規(guī)格 | T25 |
細(xì)胞數(shù) | 1x10^6 cells |
價(jià)格 | ￥1200 |
生物安全級(jí)別 | 2 |
組織來(lái)源 | 腺癌，乳腺，胸水 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁；上皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞活力 | 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion） |
細(xì)胞檢測(cè) | 細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌 |
培養(yǎng)條件 | DMEM(高糖） +10% FBS+1%P/S；37℃，5% CO2 |
傳代方法 | 建議1:2-1:3 兩天換液一次 |
凍存條件 | 90?S+10%DMSO |
一、細(xì)胞收到后操作流程
1.收到細(xì)胞拿回實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用 75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，放到顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，細(xì)胞會(huì)有不同程度影響，先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，放到培養(yǎng)箱靜置4小時(shí)左右，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片作為后期售后依據(jù))。建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
3.貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò) 80%時(shí)，根據(jù)情況傳代，若細(xì)胞未超過(guò) 80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的玩全培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25 瓶）保留 6-8ml 玩全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度超過(guò) 80%以后再進(jìn)行傳代。
4.懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體轉(zhuǎn)移至離心管，1000RPM 離心 5 分鐘，棄去上清液，管底細(xì)胞沉淀加入 10ml 玩全培養(yǎng)基吹打、重懸。放入新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿中培養(yǎng)過(guò)夜，根據(jù)細(xì)胞密度及生長(zhǎng)情況分瓶傳代。
二、MCF7 MCF-7（人乳腺癌細(xì)胞）細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)步驟（請(qǐng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作）
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 5mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6cm 皿中，加入約 6ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜），第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1）.棄去培養(yǎng)瓶中上清液，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2）.加 1-2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加 6ml 玩全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落、吹散。
3）.吹打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4）.將細(xì)胞懸液按 1：2 到 1：4 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按 1：2 到 1：5 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按 1：2到 1：3 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量咦酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM 條件下離心 5 分鐘，去除上清，
按凍存數(shù)量加入血清及 DMSO，凍存比例為 90?S+10%DMSO。
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含10% FBS的新鮮培養(yǎng)基，不建議使用原瓶中運(yùn)輸用培養(yǎng)基。
2. 如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)拍照并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
3. 細(xì)胞任何售后問(wèn)題，均需拍照存檔并及時(shí)聯(lián)系客服。
細(xì)胞用途：僅供科研使用，不能用于臨床診斷使用，細(xì)胞培養(yǎng)需要耐心與細(xì)心，希望您能獲得一個(gè)滿意的結(jié)果。
